探讨茯苓茯苓三萜类成分抗肿瘤活性与茯苓药材质量

论文导读：肿瘤细胞增殖具有抑制作用,其中人肝癌细胞株HepG2、神经瘤母细胞SH-SY5Y,宫颈癌细胞株caski经药物高浓度(100μg/ml)处理48h、72h,抑制率高达90%以上。2茯苓三萜抗肿瘤作用机理探讨采取细胞凋亡的形态学观察、琼脂糖凝胶电泳浅析凋亡细胞DN段化和流式细胞仪检测凋亡率等现代探讨策略,对茯苓三萜抗人肝癌细胞HepG2作用机制
摘要：茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf为多孔菌科真菌类药食两用传统中药,收载于历年版《中国药典》,具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安神之功效,是中医临床用于防治肿瘤疾患的常用中药。现代药理探讨表明,茯苓具有抗肿瘤、调节免疫功能的良好生物活性,其主要有效成分为多糖和三萜类物质。茯苓多糖抗肿瘤作用探讨的文献报道较多,其三萜类物质抗肿瘤活性探讨的报道相对较少。本论文在实验室前期探讨的基础上,以茯苓三萜提取物(总三萜含量达90%以上)为探讨对象,对茯苓三萜抗肿瘤的生物活性进行了较全面的探讨,并对不同菌种栽培茯苓药材的质量评价进行较系统的探讨。以期进一步诠释茯苓抗肿瘤的药效物质基础,并为提升栽培茯苓药材的品质提供科学依据。1茯苓三萜抗肿瘤生物活性探讨以多种肿瘤细胞作为受试对象,采取MTT法对茯苓三萜抗肿瘤的生物活性进行了探讨。探讨结果表明,茯苓三萜对人肝癌(HepG2)株‘、肺癌(A549)株、乳腺癌(MDA-MB-231)株、宫颈癌(Caski)株、神经瘤母细胞(SH-SY5Y)株均有显著的抑制增殖作用。本项探讨证明了茯苓三萜对多种肿瘤细胞增殖具有抑制作用,其中人肝癌细胞株HepG2、神经瘤母细胞SH-SY5Y,宫颈癌细胞株caski经药物高浓度(100μg/ml)处理48h、72h,抑制率高达90%以上。2茯苓三萜抗肿瘤作用机理探讨采取细胞凋亡的形态学观察、琼脂糖凝胶电泳浅析凋亡细胞DN段化和流式细胞仪检测凋亡率等现代探讨策略,对茯苓三萜抗人肝癌细胞HepG2作用机制进行了探讨,倒置显微镜和荧光显微镜观察表明,茯苓三萜处理后的HepG2细胞,其形态发生显著的变化,细胞数量减少,可见致密浓染,颜色有些发白的细胞核,说明茯苓三萜具有较强的诱导肝癌细胞凋亡作用；琼脂糖凝胶电泳浅析凋亡的细胞DN段化探讨结果表明,不同浓度茯苓三萜处理HepG2细胞24、48h后,能检测到凋亡中晚期的DN段(180-200bp整数倍的寡核苷酸片段)。流式细胞仪检测结果表明,40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、100μg/ml茯苓三萜处理HepG2细胞36h后,其细胞的凋亡率分别为7.2%、12.8%、39.3%、56%；说明茯苓三萜对HepG2细胞具有与药物浓度呈正相关的诱导凋亡作用。3茯苓三萜化学成分的分离鉴定与药理筛选探讨采取现代色谱技术和波谱技术,对茯苓论文导读：度时具有不同程度的抗肿瘤活性。由此本项探讨进一步诠释了茯苓抗肿瘤的物质基础。4不同菌种栽培茯苓药材的质量浅析探讨茯苓为多孔菌类中药材,其栽培历程的菌种选择是影响药材质量的关键因素。本论文对28种不同菌种栽培茯苓药材进行了薄层色谱、含量浅析和指纹图谱比较探讨。综合浅析表明,湖北麻城茯苓、GZ(贵州)菌种、ACCC5
三萜的化学成分进行分离鉴定,以中分离和鉴定了8个三萜类化合物,分别为茯苓酸(poria acid)、去氢茯苓酸(Dehydropachymic acid)、3β-羟基-16α-乙酰氧基-羊毛甾-7,9(11),24-三烯-21-酸(3β-hydroxy-16a-acetyloxy-lanosta-7,9(11),24-trien-21-oic-acid)、去氢依布里酸(Dehydroeburicoic acid)、3β-羟基-羊毛甾烷-7,9(11),24-三烯-21-酸(3β-hydroxy-lanosta-7,9(11),24-trien-21-oic-acid)3β-羟基-羊毛甾-8,24-二烯-21-酸(Trametenopc acid)、15α-羟基-去氢土莫酸(15α-hydroxydehydrotumulosic acid)、苓酸C(polyporenic acidC)。通过MTT法对8个三萜类化合物进行了抗肿瘤活性评价,结果表明8个三萜类化合物在高浓度时具有不同程度的抗肿瘤活性。由此本项探讨进一步诠释了茯苓抗肿瘤的物质基础。4不同菌种栽培茯苓药材的质量浅析探讨茯苓为多孔菌类中药材,其栽培历程的菌种选择是影响药材质量的关键因素。本论文对28种不同菌种栽培茯苓药材进行了薄层色谱、含量浅析和指纹图谱比较探讨。综合浅析表明,湖北麻城茯苓、GZ(贵州)菌种、ACCC50478菌种栽培茯苓药材中的有效物质茯苓酸、总三萜和多糖的含量较高,茯苓药材品质较优。由此,本项探讨为我国茯苓药材规范化种植提供了参考依据。关键词：茯苓论文三萜论文抗肿瘤论文细胞凋亡论文化学成分论文含量测定论文指纹图谱论文
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Abstract7-10
縮略词10-11
前言11-13
第一章 文献综述13-30
第一节 茯苓探讨概述13-24
1 茯苓化学成分探讨13-18
2 茯苓资源品质的探讨18-20
3 茯苓的药用价值及运用开发20-22
4 茯苓的抗肿瘤作用22-24
第二节 三萜类化合物抗肿瘤作用机制探讨进展24-30
1 三萜类结构与分布24
2 三萜类化合物抗肿瘤作用及机论文导读：的药理筛选探讨61-64第四章不同菌种栽培茯苓药材的质量浅析探讨64-90第一节不同菌种栽培茯苓药材的薄层色谱鉴别64-681仪器与试药64-652策略与结果65-673结果浅析67-68第二节不同菌种栽培茯苓药材的有效成分含量测定探讨68-751仪器与试药682策略与结果68-743结果浅析74-75第三节不同菌种栽培茯苓药材的三萜类成分指
制的探讨24-28
3 小结28-30
第二章 茯苓三萜抗肿瘤活性及其作用机制探讨30-49
第一节 茯苓三萜提取物的制备与含量浅析30-33
1 茯苓三萜提取物的制备30-31
2 茯苓三萜提取物的含量浅析31-33
第二节 茯苓三萜抗肿瘤活性探讨33-40
1 仪器与试药33-35
2 实验内容与策略35-36
3 实验结果与浅析36-40
第三节 茯苓三萜抗肿瘤作用机制探讨40-49
1 仪器与试药40-41
2 实验内容与策略41-43
3 实验结果与浅析43-47
4 讨论47-49
第三章 茯苓三萜化学成分的分离鉴定与药理筛选探讨49-64
1 仪器与试药49
2 有效部位化学成分的分离49-50
3 化学成分的结构鉴定50-61
4 茯苓三萜抗肿瘤活性成分的药理筛选探讨61-64
第四章 不同菌种栽培茯苓药材的质量浅析探讨64-90
第一节 不同菌种栽培茯苓药材的薄层色谱鉴别64-68
1 仪器与试药64-65
2 策略与结果65-67
3 结果浅析67-68
第二节 不同菌种栽培茯苓药材的有效成分含量测定探讨68-75
1 仪器与试药68
2 策略与结果68-74
3 结果浅析74-75
第三节 不同菌种栽培茯苓药材的三萜类成分指纹图谱探讨75-88
1 仪器与试药75
2 策略与结果75-83
3 结果浅析83-88
第四节 不同菌种栽培茯苓药材的质量综合评价88-90
1 实验结果88-89
2 结果浅析89-90
结语与革新90-91
参考文献91-97
附图97-107
发表与待发表文章107-108
致谢108