简析计量学阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变作用及其机制怎么

论文导读：果：1骨密度检测结果OVX组大鼠L3-6椎体BMD明显低于Sham组（P0.05）。2椎体骨组织形态计量学检测结果OVX组大鼠L4椎体骨小梁相对体积（BV/TV），骨小梁厚度（Tb.Th）及骨小梁数量（Tb.N）明显低于Sham组（P0.05），而骨小梁分离度（Tb.Sp），荧光周长百分率（%L.Pm），矿化沉积率（MAR）及骨形成率（BFR/BV）明显高于Sham组（P0.05）。3组织形态学观察及
摘要：腰椎间盘退变是导致下腰部疼痛的主要病因之一，下腰痛给患者带来巨大痛苦的同时，给家庭及社会带来沉重的经济负担。几点临床及流行病学探讨认为，骨质疏松与脊柱退行性疾病或椎间盘退变呈负相关性，但最近的一项关于绝经期前后妇女椎体骨密度与腰椎间盘退变相关性的探讨显示，腰椎骨密度与腰椎间盘退变呈正相关性，跟骨及桡骨的骨密度同样与椎间盘退变密切相关。此外，在前期探讨中发现卵巢切除大鼠腰椎间盘退变与椎体骨量丢失密切相关，提示对骨质疏松的治疗可能会对椎间盘退变进程发挥一定的意义。骨质疏松与椎间盘退变联系仍有着争议，由此两者之间的联系还有待进一步探讨。探讨显示，椎间盘退变与脊柱结构完整有关，包括邻近的结构如椎体及终板。椎体及终板结构的破坏将导致异常力学负荷意义于椎间盘。对绝经期前后妇女骨密度变化的探讨结果显示，骨密度与椎间盘的高度有着一定的相关性，说明椎体的结构特性与椎间盘退变程度密切相关，并且组织结构的转变同样会影响到其它结构进而出现转变。骨密度降低所引起的椎体骨折可导致椎间盘高度降低，并加快椎间盘的退变进程。软骨终板不仅是维持椎间盘正常功能的重要结构，同时还是髓核获取营养的重要途径。Nachemson等人发现，软骨终板钙化会导致软骨终板增厚，软骨终板内软骨层变薄，以而影响营养物质通过软骨终板向椎间盘的扩散，最终导致椎间盘早期出现退行性变。雌激素缺乏可引起绝经后妇女终板出现退行性转变，进而最终导致椎间盘发生退行性变。雌激素替代治疗被倡议用于骨质疏松相关的椎间盘退变的治疗。然而，患者因雌激素治疗尚有着几点不良反应而拒绝用药，由此，当前迫切需要一种新的药物用于骨质疏松相关的椎间盘退变的治疗，如二膦酸盐类药物：阿仑膦酸钠、唑来膦酸钠等。阿仑膦酸钠作为一种潜在的二膦酸盐类药物，已广泛用于绝经后妇女骨质疏松的治疗。阿仑膦酸钠可提升患者骨密度，抑制骨转换率，降低骨折发生率。最近，Neogi等人的探讨显示，阿仑膦酸钠可从抑制绝经后妇女椎间隙变窄，提示二膦酸盐类药物对椎间盘退变具有一定意义。阿仑膦酸钠对椎间盘退变的意义机制尚不清楚，由此本探讨拟通过影像学、组织形态计量学、分子生物学等办法，研究阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变的意义极为相关意义机制，为临床治疗骨质疏松相关的腰椎间盘退变提供论述依据及临床用药指导。第一部分卵巢切除大鼠椎体骨量丢失与腰椎间盘退变联系的实验探讨目的：研究卵巢切除大鼠椎体骨量丢失与大鼠腰椎间盘退变的联系。办法：20只3月龄雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为两组：假手术组（Sham）及卵巢切除组（OVX）。Sham组大鼠进行假手术，仅暴露卵巢组织但不切除。OVX组大鼠经卵巢切除术切除双侧卵巢组织，卵巢切除术后6个月，采取过量失血办法处死各组大鼠并收集L3-6节段极为椎间盘组织。椎体骨密度检测及椎体骨组织形态计量学检测用从评价大鼠椎体骨量及椎体微观结构的变化。对椎间盘进行van Gieson染色进行椎间盘组织学观察并进行组织学评分。结果：1骨密度检测结果OVX组大鼠L3-6椎体BMD明显低于Sham组（P0.05）。2椎体骨组织形态计量学检测结果OVX组大鼠L4椎体骨小梁相对体积（BV/TV），骨小梁厚度（Tb.Th）及骨小梁数量（Tb.N）明显低于Sham组（P0.05），而骨小梁分离度（Tb.Sp），荧光周长百分率（%L.Pm），矿化沉积率（MAR）及骨形成率（BFR/BV）明显高于Sham组（P0.05）。3组织形态学观察及组织学评分结果OVX组大鼠椎间盘髓核内脊索细胞大量减少，软骨样细胞大量增殖，并可见粘液样变性。软骨终板可见大量骨样组织及髓腔生成。OVX组椎间盘组织学评分明显高于Sham组（P0.05）。第二部分阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变的预防意义的实验探讨目的：本探讨旨在运用骨质疏松大鼠模型研究预防性运用阿仑膦酸钠对腰椎间盘退变的意义。办法：30只3月龄雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机等分为三组：（1）假手术组（Sham）；（2）卵巢切除+盐水组（OVX+V）；（3）卵巢切除+阿仑膦酸钠组（OVX+ALN）。Sham组大鼠进行假手术，仅暴露卵巢组织但不切除。OVX+V组及OVX+ALN组大鼠经卵巢切除术切除双侧卵巢组织后，OVX+ALN组大鼠给予阿仑膦酸钠颈后皮射，剂量为15μg/论文导读：体生物力学检测用从评价大鼠腰椎椎体骨组织特性及微观结构的变化。对椎间盘进行vanGieson染色进行椎间盘组织学观察并进行组织学评分。同时对各组大鼠椎间盘高度从及软骨终板厚度的变化进行分析对比。免疫组织化学染色及real-timePCR用于检测各组大鼠椎间盘中aggrecan、I型胶原、II型胶原、MMP-

1、MMP-3及MMP-13表达的变化

kg，一周两次。OVX+V组大鼠给予等体积的生理盐水作为对照。卵巢切除术后6个月，采取过量失血办法处死各组大鼠并收集L3-6节段椎体极为间盘组织。椎体骨密度检测、micro-CT检测及椎体生物力学检测用从评价大鼠腰椎椎体骨组织特性及微观结构的变化。对椎间盘进行van Gieson染色进行椎间盘组织学观察并进行组织学评分。同时对各组大鼠椎间盘高度从及软骨终板厚度的变化进行分析对比。免疫组织化学染色及real-time PCR用于检测各组大鼠椎间盘中aggrecan、I型胶原、II型胶原、MMP-1、MMP-3及MMP-13表达的变化。结果：1椎体骨密度检测结果OVX+V组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显低于Sham组（P0.05）。OVX+ALN组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显高于OVX+V组（P0.05）2Micro-CT检测结果OVX+V组BV/TV、Tb.N明显低于Sham组，而Tb.Sp及I明显高于Sham组（P0.05）。OVX+ALN组椎体BV/TV、Tb.N明显高于OVX+V组，Tb.Sp及I明显低于OVX+V组（P0.05）。而Tb.Th在三组间无统计学差别（P0.05）。3椎体生物力学检测结果OVX+V组椎体极限负荷（maximum load），屈服应力（yield stress），极限应力（maximum stress）及弹性模量（elastic modulus）均明显性低于Sham组（P0.05）。OVX+ALN组椎体极限负荷，屈服应力，极限应力及弹性模量均明显高于OVX+V组（P0.05）。4组织形态学观察及组织学评分结果OVX+V组椎间盘退变显著，而OVX+ALN组椎间盘髓核内仅出现少量的软骨样细胞，髓核未见粘液样变性，在纤维环与髓核交接处可见纤维软骨增殖现象。软骨终板内可见大量异常骨样组织及髓腔生成。而OVX+ALN组椎间盘退变程度较轻，仅在髓核内出现少量的软骨样细胞增殖，从及在髓核与纤维环交界处出现几点软骨细胞增殖，髓核内未出现粘液样变性。并且在软骨终板中段未发现有异常骨样组织生成。OVX+V组L5-6椎间盘组织学评分明显高于Sham组，而OVX+ALN组组织学评分明显低于OVX+V组（P0.05）。5椎间盘高度检测结果OVX+V组L5-6椎间盘高度明显低于Sham组（P0.05），OVX+ALN组L5-6椎间盘高度明显高于OVX+V组（P0.05），OVX+ALN组与Sham组L5-6椎间盘高度无明显性差别（P0.05）。6软骨终板厚度及软骨终板内骨样组织面积检测结果OVX+V组软骨终板厚度及软骨终板内骨样组织与软骨终板面积比值均明显高于Sham组（P0.05），OVX+ALN组大鼠软骨终板厚度明显低于OVX+V组（P0.05），且软骨终板内骨样组织与软骨终板面积比值明显低于OVX+V组（P0.05）。7椎间盘免疫组织化学检测结果OVX+V组髓核内，aggrecan及II型胶原染色强度明显低于Sham组。然而，OVX+ALN组aggrecan及II型胶原染色强度明显高于OVX+V组。OVX+V组髓核内MMP-1、MMP-3及MMP-13染色强度明显高于Sham组，而OVX+ALN组髓核内MMP-1、MMP-3及MMP-13染色强度明显低于OVX+V组。OVX+V组纤维环中MMP-1、MMP-3及MMP-13表达增高，其IOD值明显高于Sham组（P0.05）。但OVX+ALN组纤维环中MMP-1、MMP-3和MMP-13的表达明显降低，其IOD值明显低于OVX+V组（P0.05）。OVX+V组纤维环中I型胶原表达增高及Ⅱ型胶原表达降低，其IOD值明显高于或低于Sham组（P0.05）。而OVX+ALN组纤维环中I型胶原表达降低及Ⅱ型胶原表达增强，其IOD值明显低于或高于OVX+V组（P0.05）。OVX+V组软骨终板区域可见X型胶原免疫组织化学染色程度强于Sham组，而OVX+ALN组X型胶原染色强度低于OVX+V组。8Real-time PCR检测结果与Sham组相比，OVX+V组Col2α1mRNA表达降低（P0.05），而aggrecan及Col1α1mRNA表达明显增高（P0.05）。而OVX+ALN组aggrecan及Col2α1mRNA明显高于OVX+V组（P0.05），Co论文导读：VX+V组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显低于Sham组（P0.05），而OVX+ALN组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显高于OVX+V组（P0.05）。2Micro-CT检测结果OVX+V组BV/TV、Tb.N明显低于Sham组，而Tb.Sp明显高于Sham组（P0.05）。而OVX+ALN组椎体BV/TV、Tb.Th明显高于OVX+V组，Tb.Sp明显低于OVX+V组（P0.05）。3椎间盘组织形态学观察及评分结果OVX+V组髓核内
l1α1mRNA表达明显低于OVX+V组（P0.05）。OVX+V组MMP-1、MMP-3及MMP-13mRNA表达明显高于Sham组（P0.05）。而阿仑膦酸钠可有效抑制由卵巢切除引起的MMP-1、MMP-3及MMP-13mRNA表达的增高（P0.05）。第三部分阿仑膦酸钠治疗卵巢切除大鼠腰椎间盘退变意义效果的实验探讨目的：研究阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变的治疗意义。办法：30只3月龄雌性SD大鼠随机分为三组：（1）假手术组（Sham）；（2）卵巢切除+盐水治疗组（OVX+V）；（3）卵巢切除+阿仑膦酸钠治疗组（OVX+ALN）。OVX+V组及OVX+ALN组大鼠行双侧卵巢切除术切除双侧卵巢组织，Sham组大鼠仅暴露卵巢组织但不切除。OVX+ALN组大鼠于卵巢切除术3个月后给予阿仑膦酸钠颈后皮射，剂量为15μg/kg，一周两次。OVX+V组大鼠给予等体积的生理盐水作为对照。卵巢切除术后6个月，过量失血处死各组大鼠并收集L3-6椎体标本。椎体骨密度检测及Micro-CT检测用从评价大鼠腰椎椎体骨骼特性及微观结构的变化。运用van Gieson染色进行椎间盘组织学检测及组织学评分。免疫组织化学染色用于检测各组大鼠椎间盘中aggrecan、I型胶原、II型胶原、MMP-1及MMP-13表达的变化。结果：1椎体BMD检测结果OVX+V组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显低于Sham组（P0.05），而OVX+ALN组大鼠L3-4及L5-6椎体BMD明显高于OVX+V组（P0.05）。2Micro-CT检测结果OVX+V组BV/TV、Tb.N明显低于Sham组，而Tb.Sp明显高于Sham组（P0.05）。而OVX+ALN组椎体BV/TV、Tb.Th明显高于OVX+V组，Tb.Sp明显低于OVX+V组（P0.05）。3椎间盘组织形态学观察及评分结果OVX+V组髓核内，脊索细胞数量明显减少，并出现大量软骨样细胞增殖，髓核内可见粘液样变性。在纤维环与髓核的过渡区出现大量体积较小的软骨细胞增殖。软骨终板内异常钙化现象较为显著，并且在软骨终板的中段出现大量的异位骨样组织及髓腔。OVX+ALN组髓核内脊索细胞数量未出现明显性减少，髓核中出现一定量的软骨样细胞，并出现轻度的黏液样变性。在纤维环与髓核交接处可见纤维软骨细胞增殖现象。OVX+V组椎间盘组织学评分明显高于Sham组（P0.05），而OVX+ALN组椎间盘组织学评分明显低于OVX+V组（P0.05），但Sham组与OVX+ALN组椎间盘组织学评分无明显性差别（P0.05）。4免疫组织化学染色结果OVX+V组髓核内aggrecan及II型胶原表达较Sham组明显降低，MMP-1及MMP-13表达增强，而OVX+ALN组aggrecan及II型胶原表达高于OVX+V组，并且MMP-1及MMP-13表达弱于OVX+V组。OVX+V组纤维环中MMP-1及MMP-13表达增高，其IOD值明显高于Sham组（P0.05）。但OVX+ALN组纤维环中MMP-1和MMP-13的表达明显降低，其IOD值明显低于OVX+V组（P0.05）。OVX+V组纤维环中Ⅱ型胶原表达降低，而I型胶原表达增高，其IOD值分别明显低于或高于Sham组（P0.05）。而OVX+ALN组纤维环中Ⅱ型胶原表达增强，I型胶原表达减弱，其IOD值明显高于或低于OVX+V组（P0.05）。OVX+V组软骨终板内X型胶原表达明显高于Sham组，而OVX+ALN组软骨终板内X型胶原表达较OVX+V组明显降低。结论：1卵巢切除大鼠椎体发生骨质疏松同时可合并出现腰椎间盘的退行性转变。2阿仑膦酸钠可有效延缓卵巢切除大鼠腰椎间盘退变进程。其具体意义机制一方面可能与维持椎体及软骨终板结构的完整性及功能有关，另一方面与调控细胞外基质代谢，保护椎间盘的功能有关。3阿仑膦酸钠是一种防治与骨质疏松相关的腰椎间盘退变的潜在性药物。关键词：阿仑膦酸钠论文卵巢切除术论文组织形态计量学论文椎间盘退变论文骨质疏松论文Micro-CT论文生物力学论文
本论文由www.7ctime.com,需要可从关系人员哦。论文导读：第一部分骨质疏松与腰椎间盘退变联系的实验探讨24-48前言24材料与办法24-30结果30-32附图32-37附表37-42讨论42-44小结44-45参考文献45-48第二部分阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变的预防意义48-83前言48材料与办法48-54结果54-57附图57-70附表70-74讨论74-77小结77-78参考文献78-83第三部分阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠
摘要5-11
ABSTRACT11-20
英文缩写20-22
引言22-24
第一部分 骨质疏松与腰椎间盘退变联系的实验探讨24-48
前言24
材料与办法24-30
结果30-32
附图32-37
附表37-42
讨论42-44
小结44-45
参考文献45-48
第二部分 阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变的预防意义48-83
前言48
材料与办法48-54
结果54-57
附图57-70
附表70-74
讨论74-77
小结77-78
参考文献78-83
第三部分 阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变治疗意义的实验探讨83-104
前言83
材料与办法83-85
结果85-87
附图87-95
附表95-97
讨论97-100
小结100-101
参考文献101-104
结论104-105
综述105-124
参考文献113-124
致谢124-125
个人简历125-126