论带脉点拨腰大肌对纤维环损伤大鼠模型行为学及椎间盘IL-1β影响实验

论文导读：
摘要：课题背景椎间盘源性腰痛是中老年人的一种常见病和多发病,腰椎间盘损伤退变及局部炎症是其发病的主要病理基础。近年来探讨显示,腰椎间盘病变与脊柱动静力平衡论述密切相关：脊柱静力稳定失衡,都有着脊旁肌如腰大肌功能失调的病理状态(即伴有脊柱动力稳定失衡),而腰大肌的失代偿进一步导致临床症状出现,这种典型的“腰腹痛”被中医称为“带脉瘀滞型腰痛”。点拨腰大肌可能通过调节脊旁肌改进腰部功能,减缓疼痛。符合“点拨舒筋”、“平衡稳定”的治疗理念,是否对椎间盘本身产生影响,有做相关基础探讨的必要性。实验目的通过针刺纤维环建立腰椎间盘损伤模型,模拟椎间盘源性腰痛这一病理历程,并通过点拨腰大肌干预,观察动物行为学、椎间盘形态学及IL-1β的变化,从诠释点拨腰大肌治疗椎间盘源性腰痛的机制,为探寻推拿带脉治疗腰痛的新办法提供实验依据。实验办法Wistar雄性大鼠36只,采取随机数字表法将大鼠随机分为造模组24只,假手术组12只。实施前路纤维环全层针刺造模,制作纤维环针刺损伤模型。造模后动物最终分为假手术组、手术模型组和点拨治疗组各12只。造模2周后,点拨治疗组行俯卧位点拨腰大肌干预。隔日1次,共治疗10次(共20天)。造模2周后及手法治疗后(即造模5周后)分别对假手术组、手术模型组和点拨治疗组各进行行为学测试1次,检测旷场行为学自由探寻站立度和热刺痛觉缩爪阈值。行为学测试后,处死动物,完整取下造模椎间盘及上下半截椎体,脱钙,石蜡切片,HE染色光镜观察椎间盘形态。免疫组织化学法检测椎间盘中IL-1β、Ⅱ型胶原的表达,并进行组间数据的统计学分析。实验结果1.行为学检测：1.1旷场行为学检测：造模后2周,大鼠自由探寻站立次数,组间差别有着统计学作用(P0.05)；与假手术组对比,手术模型组自由探寻站立次数降低,有着统计学作用(P0.05)；而手术模型组与点拨治疗组的自由探寻站立次数差别无统计学作用(P0.05)。造模后5周,大鼠自由探寻站立次数组间差别有着统计学作用(PO.05)；与假手术组对比,手术模型组自由探寻站立次数有所降低,差别有着统计学作用(P0.05)；点拨治疗组自由探寻站立次数有所提升,有着统计学作用(P0.05)。1.2热刺痛觉缩爪阈值测定：造模后2周,热刺痛觉缩爪阈值组间差别有着统计学作用(P0.05)；与假手术组对比,手术模型组热刺痛觉缩爪阈值降低,有统计学作用(P0.05)；与手术模型组对比,点拨治疗组热刺痛觉缩爪阈值差别无统计学作用(P0.05)。实验结束时,即造模5周后,假手术组、手术模型组、点拨治疗组热刺痛觉缩爪阈组间差别不有着统计学作用(P0.05)2.椎间盘HE染色：髓核：假手术组髓核组织从区较密集,周围呈均匀分布,细胞数目多；手术模型组髓核组织稀疏,分布不均,细胞数目显著减少；点拨治疗组治疗组髓核接近正常组。纤维环：假手术组纤维环呈同心圆排列,规则整齐。手术模型组纤维环排列不规整；点拨治疗组纤维环接近假手术组。3.免疫组织化学结果显示：椎间盘IL-1β免疫组化阳性表达主要在纤维环细胞。相对于假手术组,手术模型组表达显著增加、增强,有着统计学作用(P0.05)；与手术模型组对比,点拨治疗组IL1-β免疫组化表达有所减少,有着统计学作用(P0.05)。髓核Ⅱ型胶原免疫组化结果显示,与假手术组对比,手术模型组的阳性表达显著减弱,有着统计学作用(P0.05)。与手术模型组对比,点拨治疗组髓核Ⅱ型胶原免疫组化表达增强,差别有着统计学作用(P0.05)。实验结论1.站立行为学、椎间盘11E染色及IL-1β、Ⅱ型胶原表达结果提示椎间盘全纤维环针剌损伤大鼠模型较为成功。2.干预治疗后,针刺损伤大鼠模型的行为学、纤维环和髓核组织形态及IL-1β、Ⅱ型胶原表达均出现良性改进,说明点拨腰大肌可推动椎间盘损伤模型的修复。3.点拨腰大肌调节动力结构腰大肌可能对静力结构椎间盘产生良性影响。关键词：推拿论文椎间盘源性腰痛论文腰大肌论文动物实验论文带脉论文
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ABSTRACT6-10
第一部分 综述部分10-34
综述一 椎间盘源性腰痛极论文导读：干预意义46-473点拨腰大肌推动椎间盘损伤修复的可能机制47-484问题与展望48-50结论50-51参考文献51-53致谢53-54个人简历54-55附图55上一页12
为推拿治疗探讨发展10-18
综述

二、椎间盘损伤动物模型相关探讨概述18-34

第二部分 实验部分34-51
前言34-35
技术路线35-36
材料与办法36-40
1 实验材料36-37
2 实验办法37-40
3 统计学处理40
结果40-45
1 行为学结果40-42
2 椎间盘形态学HE染色42
3 椎间盘髓核Ⅱ型胶原免疫组化42-43
4 椎间盘IL-1B免疫组化43-45
讨论45-50
1 关于动物模型的研究45-46
2 点拨腰大肌对腰椎间盘急性损伤模型的干预意义46-47
3 点拨腰大肌推动椎间盘损伤修复的可能机制47-48
4 问题与展望48-50
结论50-51
参考文献51-53
致谢53-54
个人简历54-55
附图55