谈述干细胞动态压应力与共培养微环境对脂肪间充质干细胞增殖及向髓核样细胞分化影响流程

论文导读：细胞共培养和压应力刺激与否分为单纯ADSCs培养组、ADSCs加压组、单纯NPCs培养组、NPCs加压组、共培养组和共培养联合压力组，于干预至第7d时采取RealtimePCR和WesternBlot检测各组贴壁细胞SOX-9，Ⅱ型胶原及aggrecan的表达差别。【结果】实验所用ADSCs经流式细胞仪鉴定显示CD29、CD44阳性率分别为99.72%、99.55%，CD3

4、CD45阳性

摘要：【目的】研究动态压应力与共培养微环境条件对大鼠脂肪间充质干细胞（ADSCs）增殖及向髓核样细胞分化的影响。【办法】取原代SD大鼠ADSCs体外培养并扩增，流式细胞仪鉴定细胞表面标志物后，从第三代ADSCs经可控细胞动态压应力加载装置(90mmHg，12h/d)行刺激，并设置阴性组，采取CFSE染色法测细胞增殖活性，分别于染色后24h,48h,72h，96h从倒置荧光显微镜观察并从流式细胞仪检测荧光衰减度。同时将包裹有SD大鼠髓核细胞（NPCs）的藻酸盐微球与第三代ADSCs混合共培养，按细胞共培养和压应力刺激与否分为单纯ADSCs培养组、ADSCs加压组、单纯NPCs培养组、NPCs加压组、共培养组和共培养联合压力组，于干预至第7d时采取RealtimePCR和WesternBlot检测各组贴壁细胞SOX-9，Ⅱ型胶原及aggrecan的表达差别。【结果】实验所用ADSCs经流式细胞仪鉴定显示CD29、CD44阳性率分别为99.72%、99.55%，CD34、CD45阳性率分别为1.40%、1.80%；CFSE结果显示ADSCs压力组细胞的增殖活性较单纯ADSCs培养组明显提升；软骨特异性指标SOX-9，Ⅱ型胶原及aggrecan的基因表达水平在共培养联合压力组中增多最为明显，其中Ⅱ型胶原基因表达水平变化与其蛋白表达量变化相一致。【结论】动态压应力能推动ADSCs的增殖，并且在联合NPCs共培养微环境下可诱导ADSCs向髓核样细胞分化。关键词：动态压应力论文共培养论文脂肪间充质干细胞（ADSCs）论文髓核细胞（NPCs）论文
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ABSTRACT6-9
绪言9
材料与办法9-23
检测指标23-24
结果24-31
讨论31-34
参考文献34-36
综述36-48
参考文献44-48
致谢48-49