论穿心莲穿心莲内酯对牙周炎骨吸收影响及其机理实验

论文导读：确T细胞过度活化可引发牙周炎，IFN-γ的增强抗原呈递作用和NF-κB通路活化与牙槽骨吸收联系密切，但牙周炎所致牙槽骨吸收机理尚不明确，因而一般抗炎治疗效果不佳。祖国医学在治疗多种复杂性疾病方面有显著的优势，在中药中具有独特作用机制的小分子天然药物如穿心莲内酯等受到关注。探讨表明穿心莲内酯可以抑制NF-κB信号通路，
摘要：背景牙周炎是人类的常见病和多发病，本质上属于非特异性的炎症和特异性的免疫应答而导致牙周组织的破坏，其中牙槽骨吸收是牙周炎重要的病理历程，也是人类失牙的重要理由。现已明确T细胞过度活化可引发牙周炎，IFN-γ的增强抗原呈递作用和NF-κB通路活化与牙槽骨吸收联系密切，但牙周炎所致牙槽骨吸收机理尚不明确，因而一般抗炎治疗效果不佳。祖国医学在治疗多种复杂性疾病方面有显著的优势，在中药中具有独特作用机制的小分子天然药物如穿心莲内酯等受到关注。探讨表明穿心莲内酯可以抑制NF-κB信号通路，发挥抗炎和免疫调节作用，但其是否能够抑制T细胞的过度活化，抑制牙周炎骨吸收还有待探讨结果的验证，同时，穿心莲内酯抑制NF-κB信号通路的作用和牙周炎骨吸收的IFN-γ依赖途径之间的相互联系，都需要进一步深入探讨。目的通过穿心莲内酯抑制实验性牙周炎骨吸收的效果观察，探讨穿心莲内酯在牙周炎免疫调节治疗中的作用，浅析穿心莲内酯抑制T细胞过度活化的作用机制，探讨IFN-γ依赖性牙周炎牙槽骨吸收和穿心莲内酯抑制NF-κB信号通路作用之间的联系，旨在为牙周炎牙槽骨吸收的免疫调节治疗提供新的思路和实验室证据。策略采取饱和水溶液法制备穿心莲内酯(andrographopde)-β-环糊精包合物，提升穿心莲内酯药物的溶解度；采取LPS局部注射的方式建立小鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收模型，以模型动物为基础，根据分组情况，分别给予实验动物穿心莲内酯灌胃和腹腔注射IFN-γ-Ab进行干预，进行体内和体外实验探讨。首先在体内，通过显微CT和组织病理学切片探讨穿心莲内酯对于LPS诱导的实验性牙周炎骨吸收的影响，利用血清学免疫检测和免疫组化染色探讨穿心莲内酯对牙周炎骨吸收相关因子IFN-γ和TNF-α等的调控作用；随后在体外，获取牙周炎状态下动物体内的T细胞和骨髓巨噬细胞进行原代培养并进行相关探讨，运用流式细胞术、实时定量PCR和Westernblot观察穿心莲内酯对T细胞活化，IFN-γ、RANKL和TNF-α炎症细胞因子的表达和T细胞NF-κB通路活化的影响，观察穿心莲内酯对巨噬细胞增殖特性、抗原递呈功能调节和NF-κB通路活化的影响；利用破骨细胞诱导分化培养基体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，诱导其向破骨细胞表型分化，观察穿心莲内酯对条件培养基诱导破骨细胞终末分化形成作用的影响和此历程中细胞内NF-κB通论文导读：P0.05）；穿心莲内酯处理组可以抑制巨噬细胞的增殖生长，下调巨噬细胞中CIITA的表达，抑制巨噬细胞中NF-κB通路的活化，结果较之未处理组差别显著（P0.05），但是和IFN-γ-Ab处理组作用无差别（P0.05）；穿心莲内酯处理组可以抑制条件培养基诱导RAW264.7细胞形成破骨细胞终末分化的作用，抑制RAW264.7细胞中NF-κB通路的活化，结果较之未
路活化情况。结果经过β-环糊精的物理包合作用，穿心莲内酯在37℃时的溶解度以0.072mg·ml~(-1)提升至0.956mg·ml~(-1)；显微CT显示：穿心莲内酯灌胃使得牙周炎骨吸收模型动物的骨小梁相关参数较之未处理组有显著改善（P0.05）；穿心莲内酯灌胃使得牙周炎骨吸收模型动物血清中炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达水平较之未处理组显著降低（P0.05），但是和小鼠腹腔注射IFN-γ-Ab作用无差别（P0.05）；穿心莲内酯灌胃使得牙周炎骨吸收模型动物牙周组织中的炎症分子表达较之未处理组显著减少（P 0.05）；穿心莲内酯处理组可以下调T细胞中IFN-γ、RANKL和TNF-α炎症因子的表达，抑制T细胞中NF-κB通路的活化，结果较之未处理组差别显著（P0.05），但是和IFN-γ-Ab处理组作用无差别（P0.05）；穿心莲内酯处理组可以抑制巨噬细胞的增殖生长，下调巨噬细胞中CIITA的表达，抑制巨噬细胞中NF-κB通路的活化，结果较之未处理组差别显著（P0.05），但是和IFN-γ-Ab处理组作用无差别（P0.05）；穿心莲内酯处理组可以抑制条件培养基诱导RAW264.7细胞形成破骨细胞终末分化的作用，抑制RAW264.7细胞中NF-κB通路的活化，结果较之未处理组差别显著（P0.05），但是和IFN-γ-Ab处理组作用无差别（P0.05）。结论穿心莲内酯可以抑制实验性牙周炎的牙槽骨吸收。本探讨结果提示：穿心莲内酯可以抑制T细胞过度活化，对实验性牙周炎具有免疫调节作用，可以抑制IFN-γ依赖性的牙周炎牙槽骨吸收，这些作用的产生都和穿心莲内酯抑制NF-κB信号通路的活化作用有关。关键词：骨吸收论文穿心莲内酯论文免疫调节论文IFN-γ论文NF-κB论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。缩略语表6-8
中文摘要8-11
Abstract11-14
前言14-15
文献回顾一15-25
文献回顾二25-39
正文39-95
第一部分 饱和水溶液法制备穿心莲内酯-Β-环糊精包合物的探讨39-51
1 材料40
2 策略40-44
3 结果44-48
4 讨论48-51
第二部分 穿心莲内酯影响牙周炎骨吸收论文导读：页123
的体内实验探讨51-67
实验

一、穿心莲内酯对 LPS 致牙周炎骨吸收的影响51-59

1 材料51-52
2 策略52-54
3 结果54-57
4 讨论57-59
实验

二、穿心莲内酯对 LPS 致牙周炎骨吸收相关因子的调控作用59-67

1 材料59-60
2 策略60-63
3 结果63-65
4 讨论65-67
第三部分 穿心莲内酯影响牙周炎骨吸收的体外实验探讨67-95
实验

一、穿心莲内酯对 T 细胞生物学特性的影响67-81

1 材料68-69
2 策略69-74
3 结果74-78
4 讨论78-81
实验

二、穿心莲内酯对巨噬细胞生物学特性的影响81-88

1 材料81-82
2 策略82-84
3 结果84-86
4 讨论86-88
实验

三、穿心莲内酯对破骨细胞终末分化形成作用的影响88-95

1 材料89
2 策略89-91
3 结果91-93
4 讨论93-95
小结95-97
参考文献97-116
个人简历和探讨成果116-118
致谢118