探讨乳酸菌猪源益生乳杆菌分离、筛选及运用

论文导读：act4-121引言12-211.1探讨背景121.2猪消化道微生态系统12-131.2.1消化道菌群结构121.2.2消化道菌群作用12-131.2.3母猪消化道菌群平衡131.3益生菌概述13-161.3.1益生菌的定义13-141.3.2益生菌的特点141.3.3益生菌的种类14-151.3.4益生菌的作用机理15-161.4益生菌冻干制剂的探讨16-181.

4.1冷冻干燥技术16-171.

摘要：本探讨采取益生菌分离筛选的常规策略,依据乳酸杆菌的判断标准,分离得到一株具有优良特性的约氏乳杆菌XS4,并在对其体外生长特性、发酵生产工艺进行探讨的基础上,开展了母猪饲喂试验。取得了如下结果：1、以健康母猪粪便中分离筛选出一株产酸、耐酸、耐胆盐能力强的菌株。经鉴定为约氏乳杆菌,命名为L. johnsonii XS4。2、该株约氏乳杆菌最适生长温度为35℃,最适生长pH为6.0～7.5,最适碳氮源配比为2%蔗糖+2%大豆蛋白胨+2%牛肉膏+0.75%酵母浸粉。该株约氏乳杆菌在pH2人工胃液中处理2h,存活率可达59.94%,处理4h,存活率可达46.22%；人工肠液对该菌无抑制作用；该菌在65。C处理60s,活性可保持70.9%,70℃处理60s,存活率仅为4.77%。该株约氏乳杆菌对猪源大肠杆菌、猪霍乱沙门菌和金葡萄球菌均具有抑制作用。在pH6.5的MRS培养基中,35℃培养48h,胞外多糖产量为309.39mg/L3、采取响应面法对该株约氏乳杆菌冻干保护剂配比进行优化。结果发现脱脂乳、海藻糖、L-半胱氨酸对细菌存活率影响显著,其最优复配比例为：脱脂乳15.70g/100mL、海藻糖7.68g/100mL、L-半胱氨酸1.60g/100mL。优化后的保护剂冻干存活率为87.42%,与预测值87.26%非常接近。4、母猪饲喂试验表明,与对照组相比,添加6.0×109CFU/kg饲料约氏乳杆菌制剂使初生窝重、20d窝重、断奶窝重、窝断奶仔猪数分别提升了1.89kg(尸0.05)、5.67kg(P0.01)、7.04kg(P0.05)、0.88头(P0.05);使粪中大肠杆菌和金葡萄球菌数量分别下降了54.67%(P0.01)、35.91%(P0.05)；使血清IgG含量提升了14.68%(P0.05),谷丙转氨酶含量降低了17.19%(P0.01)。由此可见,日粮中添加约氏乳杆菌对母猪生产繁殖性能有一定的改善作用。关键词：乳酸菌论文分离论文筛选论文约氏乳杆菌论文冻干论文母猪论文
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Abstract4-12
1 引言12-21

1.1 探讨背景12

1.2 猪消化道微生态系统12-13

1.2.1 消化道菌群结构12

1.2.2 消化道菌群作用12-13

1.2.3 母猪消化道菌群平衡13

1.3 益生菌概述13-16

1.3.1 益生菌的定义13-14

1.3.2 益生菌的特点14

1.3.3 益生菌的种类14-15

1.3.4 益生菌的作用机理15-16

1.4 益生菌冻干制剂的探讨16-18

1.4.1 冷冻干燥技术16-17

1.4.2 冷冻干燥历程对益生菌的损伤17

1.4.3 冻干保护剂的分类17-18

1.5 益生菌在母猪生产中的运用18-19

1.5.1 提升母猪繁殖性能18

1.5.2 改善母猪肠道健康18

1.5.3 提升母猪生产性能18-19

1.5.4 提升母猪免疫力19

1.6 本探讨的目的和作用19-20

1.7 技术路线20

1.8 本探讨的革新点20-21

2 乳杆菌菌株的分离筛选及鉴定21-31

2.1 材料与策略21-23

2.

1.1 主要试验材料21

2.

1.2 主要仪器设备21-22

2.

1.3 试验策略22-23

2.2 结果与浅析23-29

2.1 产酸试验23

2.2 耐酸试验23-24

2.3 耐胆盐试验24-25

2.4 属的鉴定25

2.5 种的鉴定25-27

2.6 菌株XS4的鉴定结果27-29

2.3 讨论29-30

2.4 小结30-31

3 约氏乳杆菌生物学特性的探讨31-47

3.1 材料与策略31-34

3.

1.1 主要试验材料31

3.

1.2 主要仪器设备31-32

3.

1.3 试验策略32-34

3.2 结果与浅析34-44
3.

2.1 生长曲线测定结果34-36

3.

2.2 最适生长温度测定结果36

3.

2.3 最适生长pH测定结果36-37

3.

2.4 碳源筛选结果37-38

3.

2.5 蛋白胨筛选结果38-39

3.

2.6 氮源筛选结果39

3.

2.7 碳源、氮源量的优化结果39-40

3.

2.8 人工胃论文导读：-67参考文献67-77作者介绍77上一页12

液耐受结果40-41
3.

2.9 人工肠液耐受结果41-42

3.

2.10 耐热试验结果42

3.

2.11 抑菌试验结果42-43

3.

2.12 耐药性测定结果43

3.

2.13 胞外多糖测定43-44

3.3 讨论44-46

3.4 小结46-47

4 约氏乳杆菌冻干制剂探讨47-57

4.1 材料与策略47-49

4.

1.1 主要试验材料47

4.

1.2 主要试验仪器47

4.

1.3 工艺流程47-48

4.

1.4 试验策略48-49

4.2 结果与浅析49-55
4.

2.1 单因素选取复合试验因素水平49-50

4.

2.2 Plackett-Burman试验筛选主要影响因素50-51

4.

2.3 最陡爬坡试验探讨最大响应值的响应区域51-52

4.

2.4 响应面试验优化最佳保护剂配比52-55

4.3 讨论55-56

4.4 小结56-57

5 约氏乳杆菌对母猪生产、繁殖性能的影响57-65

5.1 材料与策略57-59

5.

1.1 主要试验材料与仪器57

5.

1.2 试验动物及管理57-58

5.

1.3 试验日粮设计58-59

5.

1.4 测定指标及策略59

5.

1.5 数据浅析59

5.2 结果与浅析59-62
5.

2.1 饲粮添加约氏乳杆菌制剂对母猪繁殖性能的影响59-60

5.

2.2 饲粮添加约氏乳杆菌制剂对母猪体况的影响60

5.

2.3 饲粮添加约氏乳杆菌制剂对母猪肠道菌群的影响60-61

5.2.4 饲粮添加约氏乳杆菌制剂对母猪血清中免疫球蛋白G(IgG)和结合珠蛋白(HP)的影响61-62
5.

2.5 饲粮添加约氏乳杆菌制剂对母猪血清生化指标的影响62

5.3 讨论62-64

5.4 小结64-65

6 结论65-66
致谢66-67
参考文献67-77
作者介绍77