浅论毛细管仿刺参多糖提取分离及初步结构

论文导读：表明，仿刺参多糖中含有羧基、羟基、乙酰氨基、硫酸基和岩藻糖，在848cm~(-1)的吸收峰表明其硫酸基取代位置是岩藻糖的C-4位或者氨基半乳糖的C-4位。仿刺参多糖通过Q-FF阴离子交换树脂洗脱，分别在盐浓度为0mol/L、0.7mol/L和1,5mol/L时得到三个组分，随后进行透析除盐，利用凝胶柱层析分离纯化得到SC-

1、SC-2和SC-3。利用高效毛细

摘要：本论文以仿刺参为原料进行了仿刺参多糖的提取、分离，并对仿刺身多糖中的糖胺聚糖进行了理化性质和结构浅析。建立并优化了柱前衍生高效毛细管电泳法测定海参多糖单糖组成的策略，该策略具有简单、快速、分离效率高等特点，能同时测定海参多糖中氨基糖、中性糖及糖醛酸的组成，对于探讨海参多糖的单糖组成有重要作用。仿刺参多糖提取釆用木瓜蛋白酶水解、乙醇沉淀和醋酸钾沉淀法；分子量及其分布的测定采取高效凝胶渗透色谱法；化学组成及其单糖组成分别采取传统化学策略和柱前衍生高效毛细管电泳法，并对两种策略的结果进行了比较；利用阴离子交换柱层析和凝胶柱层析对仿刺参多糖不同组分进行了分离纯化；仿刺参糖胺聚糖硫酸基的取代位置可以通过红外色谱法、核磁共振波谱以及质谱法测定；糖胺聚糖的支链和主链结构可以通过部分酸水解，凝胶柱层析分离，色谱浅析测定。探讨结果表明，通过温和的酶水解法的到的仿刺参多糖得率为1.18%。（以鲜海参计算）。GPC法得到的分子量为、万,仿刺参多糖总糖、蛋白质、硫酸基、糖醛酸及氨基糖含量分别为51.5他5.50%、25.07%、17.20%和13.53%。气相色谱法测定其中性糖结果表明仿刺参多糖主要含有岩藻糖，含量为15‘4%。柱前衍生高效毛细管色谱法采取4mol/L TFA，110°C,6h的水解条件，利用1--3--5-吡唑啉酮（PMP)衍生，于紫外245nm处检测，进行毛细管电泳浅析。实验对10种不同海参多糖进行了单糖组成浅析，建立了高效毛细管电泳法测定海参单糖组成的策略。仿刺参多糖的单糖组成为GalN: Glc: Man:Fuc: Gal: GlcUA=3.23:0.83:0.38:3.97：0.68:1.00，其对糖醛酸和氨基糖的组成测定结果和化学法测定结果基本一致，但对中性糖的测定，GC策略测定结果偏红外波谱结果表明，仿刺参多糖中含有羧基、羟基、乙酰氨基、硫酸基和岩藻糖，在848cm~(-1)的吸收峰表明其硫酸基取代位置是岩藻糖的C-4位或者氨基半乳糖的C-4位。仿刺参多糖通过Q-FF阴离子交换树脂洗脱，分别在盐浓度为0mol/L、0.7mol/L和1,5mol/L时得到三个组分，随后进行透析除盐，利用凝胶柱层析分离纯化得到SC-1、SC-2和SC-3。利用高效毛细管电泳确定SC-】为硫酸岩藻多糖，SC-2和SC-3为两种不同的糖胺聚糖。结合红外光谱和1HNMR，论文导读：探讨近况21-223立题背景和作用22-24第一章仿刺参多糖的提取分离及化学组成浅析24-361.1材料与仪器24-251.2实验策略25-291.2.1仿刺参多糖的提取分离251.2.2多糖化学组成浅析25-281.2.3Q-SepharoseFF阴离子交换柱分离海参多糖28-291.3实验结果与讨论29-361.3.1仿刺参多糖的提取分离291.3.2分子量测定29-301.3.3海
我们推测SC-1有着少量的C-4位硫酸基取代；SC-2岩藻糖上3,4-双硫酸基取代和无硫酸基取代的七化学位移信号；SC-3岩藻糖上2,4-双硫酸基取代和3,4-双硫酸基取代的信号。关键词：仿刺参论文海参多糖论文柱前衍生高效毛细管电泳论文分离纯化论文结构剖析论文
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Abstract7-11
前言11-24

1.海洋多糖的探讨概况11-12

2. 海参多糖探讨近况12-22

2.1 海参多糖的提取分离13

2.2 海参多糖的分离纯化13-14

2.3 海参多糖的化学组成浅析14-18

2.3.1 海参多糖浅析和化学检测14-16

2.3.2 海参多糖的单糖组成浅析16-18

2.4 海参多糖结构浅析18-22

2.4.1 化学策略19-20

2.4.2 生物学策略20

2.4.3 物理策略20-21

2.4.4 海参多糖结构探讨近况21-22

3 立题背景和作用22-24
第一章 仿刺参多糖的提取分离及化学组成浅析24-36

1.1 材料与仪器24-25

1.2 实验策略25-29

1.2.1 仿刺参多糖的提取分离25

1.2.2 多糖化学组成浅析25-28

1.2.3 Q-Sepharose FF 阴离子交换柱分离海参多糖28-29

1.3 实验结果与讨论29-36

1.3.1 仿刺参多糖的提取分离29

1.3.2 分子量测定29-30

1.3.3 海参多糖化学组成浅析30-34

1.3.5 阴离子交换柱层析分离海参多糖的不同组分34-36

第二章 高效毛细管电泳法测定海参多糖的单糖组成36-45

2.1 材料与仪器36-37

2.2 实验策略37-39

2.1 样品的水解37

2.2 样品及标准品的衍生37

2.3 色谱条件37-38

2.4 单糖的摩尔比浅析和计算策略38

2.5 色谱条件的优化38-39

2.3 结果与讨论39-45

2.3.1 背景电解质 pH 对单糖衍生物分离的影响39-40

2.3.2 背景电解质浓度对单糖衍生物分离的影响40-41

2.3.3 各种单糖衍生物迁移时间的确定41-42

2.3.4 线性联系的考察42

2.3.5 精密度的考察42

2.3.6 重复性试验结果42-4论文导读：单糖组成浅析43-45第三章仿刺参多糖不同组分的波谱浅析比较45-543.1材料与仪器45-463.2实验策略463.2.1红外光谱浅析（IR）463.2.2核磁共振波谱剖析（NMR）463.3结果与讨论46-543.3.1不同海参多糖的红外光谱浅析46-503.3.2不同海参多糖的1HNMR谱图浅析50-54总结54-56致谢56-57参考文献57-61个人简历61发表的学术论文61
3

2.3.7 检测限和定量限43

2.3.8 仿刺参多糖和三种不同组分 SC -

1、SC-2、SC-3 的单糖组成浅析43-45

第三章 仿刺参多糖不同组分的波谱浅析比较45-54

3.1 材料与仪器45-46

3.2 实验策略46

3.

2.1 红外光谱浅析（IR）46

3.

2.2 核磁共振波谱剖析（NMR）46

3.3 结果与讨论46-54

3.1 不同海参多糖的红外光谱浅析46-50

3.2 不同海参多糖的1H NMR 谱图浅析50-54

总结54-56
致谢56-57
参考文献57-61
个人简历61
发表的学术论文61