谈谈同位素基于稳定同位素标记吉拉德试剂P还原性寡糖相对定量法

论文导读：讨。关键词：相对定量论文电喷雾质谱论文稳定同位素标记论文Girard’s论文reagent论文P论文本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要3-4Abstract4-5目录5-6第一章绪论6-17

1.1引言62糖类浅析策略6-93常用衍生化

摘要：糖基化是蛋白质后修饰最重要的方式之一,50%以上的蛋白具有糖基化现象。目前的探讨表明,如果糖基化修饰出现缺陷,就会发生先天性糖基化缺陷疾病(CDG),许多恶性肿瘤组织与正常组织相比显示出蛋白质糖基化的显著差别。由此,糖类物质是重要的生物标志物,可为重大恶性疾病的早期诊断带来希望。近年来,生物质谱已成为生物大分子的重要探讨手段,而稳定同位素标记的策略成为差别糖组学的重要浅析策略。本论文建立了一种基于吉拉德试剂P(Girard's reagent P,GP)衍生化的do/d5稳定同位素标记-电喷雾电离质谱相对定量浅析还原性寡糖链的策略。吉拉德试剂衍生试剂因自身带有正电荷,衍生后使被测物质也带有永久正电荷,在质谱检测时主要形成[M]+离子,避开了其它衍生试剂在质谱检测中随机出现的[M+H]+[M+Na]+和[M+K]+等多种金属加合离子峰并存的现象,检测灵敏度提升的同时,使质谱图变得简单。do/d5-GP试剂标记的糖链等摩尔比混合后,在质谱图上出现质量数相差5Da的对峰,对峰中同位素衍生物之间质谱丰度的差别体现了两种来源样品中糖链在量上的差别。据此可以实现糖链的定性及相对定量浅析。本探讨通过对由PNGase F释放的鸡卵清白蛋白和Ribonuclease B中N-糖链的相对定量浅析探讨,验证了该策略具有10倍以内混合摩尔比的相对定量线性范围(R=0.9991)、良好的重复性(平均变异系数CV=3.8%)和较高的准确性(平均误差RE=11.6%)。并将该策略运用于牛和猪IgG中N-糖链,不同哺乳期人乳中游离寡糖以及人血清样品中N-糖链的相对定量浅析,表明该策略可以用于两种不同来源样品的糖组差别探讨。关键词：相对定量论文电喷雾质谱论文稳定同位素标记论文Girard’s论文reagent论文P论文
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Abstract4-5
目录5-6
第一章 绪论6-17

1.1 引言6

1.2 糖类浅析策略6-9

1.3 常用衍生化策略及试剂9-12

1.4 稳定同位素标记在糖类物质定量浅析上的运用12-15

1.5 本探讨的作用15-17

第二章 基于吉拉德P试剂稳定同位素标论文导读：记的还原性糖链相对定量策略的建立17-282.1概述17-182.2实验与策略18-202.3结果与讨论20-272.4本章小结27-28第三章吉拉德试剂P稳定同位素相对定量策略的运用28-393.1实验与策略28-293.2结果与讨论29-383.3本章小结38-39结论39-40参考文献40-51附录51-53致谢53上一页12
记的还原性糖链相对定量策略的建立17-28

2.1 概述17-18

2.2 实验与策略18-20

2.3 结果与讨论20-27

2.4 本章小结27-28

第三章 吉拉德试剂P稳定同位素相对定量策略的运用28-39

3.1 实验与策略28-29

3.2 结果与讨论29-38

3.3 本章小结38-39

结论39-40
参考文献40-51
附录51-53
致谢53