膝骨关节炎,退变,黄芪甲苷,软骨细胞,

论文导读：的作用18-20第二部分黄芪甲苷防治膝骨关节炎软骨退变的机理探讨20-271材料与策略21-221.1实验仪器211.2主要药物与试剂211.3实验对象211.4实验策略21-221.5统计学策略222结果22-253讨论25-264探讨总结26-27全文探讨总结27-29致谢29-30参考文献30-32附录32-53综述一32-38参考文献36-38综述二38-41参考文献39-41论著
摘要：目的：探讨黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变关节软骨基质金属蛋白酶-1、3(MMP-1、MMP-3)表达的影响。策略：取人手术后的退变膝关节软骨,进行细胞培养,将培养的软骨细胞分离传代后,取第三代细胞,通过HE、Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行软骨细胞鉴定,并进行MMP-1、MMP-3免疫荧光染色观察软骨细胞退变情况后分为六组(A组：软骨细胞+DMEM对照组；B组：软骨细胞+25mmol/L黄芪甲苷；C组：软骨细胞+50mmol/L黄芪甲苷；D组：软骨细胞+75mmol/L黄芪甲苷；E组：软骨细胞+100mmol/L黄芪甲苷；F组：软骨细胞+500mmol/L黄芪甲苷),取4h、8h、24h、48h、72h采取实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)检测各组退变软骨内基质金属蛋白酶-1、3(MMP-1、MMP-3)表达mRN A的表达情况。结果：培养的细胞为退变的软骨细胞,实时荧光定量PCR结果显示,不同浓度黄芪甲苷有下调退变膝关节软骨细胞MMP-1、MMP-3的作用,且50mmol/L黄芪甲苷在24h时对MMP-1、MMP-3的下调作用最好；在24h、48h、72h不同浓度(25-100mmol/l)黄芪甲苷膝关节软骨细胞MMP-1、MMP-3表达量低于对照组(P0.01),在24h时MMP-1、MMP-3的表达量最低。结论：黄芪甲苷可通过抑制退变软骨细胞合成MMP-1、MMP-3,来达到延缓膝骨关节炎关节软骨细胞的退变。关键词：膝骨关节炎论文退变论文黄芪甲苷论文软骨细胞论文
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ABSTRACT8-9
缩略词9-10
引言10-12
第一部分 人退变关节软骨细胞分离培养12-20
1 材料和策略12-15

1.1 实验材料12

1.2 实验策略12-13

1.3 形态学检测13-15

2 结果15-17

2.1 软骨细胞生长曲线15

2.2 原代细胞的形态、增殖、传代观察15-16

2.3 传代细胞的HE、甲苯胺蓝、COLⅡ、ACAN等免疫荧光染色观察16-17

3 讨论17-18
4 探讨总结18-20

4.1 关节软骨细胞的分离策略18

4.2 关节软骨细胞的体外培养18

4.3 软骨细胞鉴定及其它细胞因子免疫荧光表达的作用18-20

第二部分 黄芪甲苷防治膝骨关节炎软骨退变的机理探讨20-27
1 材料与策略21-22

1.1 实验仪器21

1.2 主要药物与试剂21

1.3 实验对象21

1.4 实验策略21-22

1.5 统计学策略22

2 结果22-25
3 讨论25-26
4 探讨总结26-27
全文探讨总结27-29
致谢29-30
参考文献30-32
附录32-53
综述一32-38
参考文献36-38
综述二38-41
参考文献39-41
论著141-45
论著245-53
发表论文和参加会议情况53
论文发表情况53
参加会议情况53